分光光度計原理內(nèi)行人都知道，物質(zhì)在光的照射激發(fā)下，產(chǎn)生了對光吸收的效應(yīng)，物質(zhì)對光的吸收是具有選擇性的，各種不同的物質(zhì)都是具有其各自的吸收光譜，因此當某單色光通過溶液時，其能量就會被吸收而減弱，光能量減弱的程度和物質(zhì)的濃度有一定的比例關(guān)系，也即符合于比色原理比耳定律。

　　然而對于分光光度計吸光度測量條件的選擇，相信很多人都不太了解，一般來說可依據(jù)以下幾點去綜合選擇：

　　1.入射光波長的選擇

　　應(yīng)根據(jù)吸收光譜曲線，選擇溶液具有最大吸收時的波長作為入射光的波長。

　　如顯色劑與鈷絡(luò)合物在420nm波長處均有最大吸收峰。如用此波長測定鈷，則未反應(yīng)的顯色劑會造成干擾而降低測定的準確度。因此必須選擇在500nm波長處測定，在此波長下顯色劑不發(fā)生吸收。而鈷絡(luò)合物則有一吸收平臺。

　　2.參比溶液的選擇

　　1）如果顯色劑或其他試劑略有吸收，應(yīng)用空白溶液（不加試樣的溶液）作參比溶液。

　　2）如果僅待測物與顯色劑的反應(yīng)產(chǎn)物有吸收，可用純?nèi)軇┳鲄⒈热芤骸?/div>